在DNA分析的周转时间方面，最新的进展是在30 s以内的极端聚合酶链反应和5 s以内的聚合酶链反应产物的高速熔化。以前，这些步骤是在不同的专业仪器上进行的。最近，有研究介绍了将极端PCR和高速熔化与实时荧光监测相结合的检测和基因分型。该研究在66.4°C 至93.7°C的温度范围内，以1.05 s的循环时间，提高微流体平台的速度，使终点熔化率达到8°C /s。增加引物和聚合酶浓度来缩短循环时间。利用合成序列对乙型肝炎病毒（70 bp）和艰难梭菌（83 bp）的片段进行实时PCR和高速熔融扩增。对30个人类基因组样本在F 2 C.*97、F 5 C.1601、MTHFR C.665和MTHFR C.1286进行了盲基因分型研究。结果发现，当总循环时间小于1分钟时，标准快速循环PCR化学法不产生任何产物，但当引物（5μmol/L）和聚合酶（0.45 U/μL）浓度增加时，有效扩增是可能的。传染性靶标在52至71秒内被扩增和鉴定。来自人DNA的单核苷酸变体的实时PCR和基因分型在75至87秒内实现，并且与已知基因型100％一致。总之，该研究实现了在1分钟内可进行快速熔融的极端聚合酶链反应，结合极端聚合酶链反应和快速熔融反应，表明未来在鉴定、定量和变异分型方面的分子分析是可行的。
原文题目：Integrated Extreme Real-Time PCR andHigh-Speed Melting Analysis in 52 to 87 Seconds
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