第三代表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂奥西替尼(AZD9291)对发生EGFR敏感突变及T790M耐药突变的非小细胞肺癌(NSCLC)患者均显示出了良好的临床疗效。然而,其与放疗联合的作用尚不清楚。

某研究中我们分别从体外、体内水平研究了奥西替尼对EGFR T790M突变NSCLC(NCI-H1975)的放疗增敏作用。结果显示奥西替尼与放疗联合后在抑制细胞增殖和克隆形成方面可产生协同效应,减少了细胞的G2/M期阻滞,并且以浓度依赖性及时间依赖性的方式延迟受照射细胞的DNA损伤修复。作用机理方面,奥西替尼单独或与放疗联合应用均可显著地抑制EGFR(Tyr1068/Tyr1173),AKT和ERK的磷酸化。

此外,在NCI-H1975移植瘤小鼠模型中,奥西替尼可显著增强放疗对移植瘤的抑制作用。因此,我们的研究提示奥西替尼对EGFR T790M突变NSCLC具有放疗增敏作用,为奥西替尼联合放疗的临床应用提供了理论依据。

T790M突变是EGFR突变患者使用TKIs后最常见的获得耐药机制之一。AZD9291是一个不可逆且具突变选择的EGFR-TKI，针对EGFR敏感突变和T790M均有效。在AZD9291的I期临床研究AURA中，T790M阳性肺癌患者的缓解率大于60%。但AZD9291的获得性耐药潜在机制还不得而知。

为了探索AZD9291的耐药机制，实验收集AURA研究中治疗前后血浆提取的cfDNA。针对7名患者首次运用二代测序进行了深入研究，以Illumina二代测序平台和PCR对20个基因panel的外显子进行检测发现，某患者血浆中存在一个新的突变，即位于20外显子上的C797S突变，而这一突变在治疗前不存在。相比于EGFR敏感突变和T790M突变，AZD9291会促使C797S在Ba/F3细胞中以大于100倍增长速度稳定表达。为了证实血液的二代测序结果，运用ddPCR 对EGFR突变检测（包括C797S）进行验证，结果有15个T790M阳性患者被确认。

数字PCR显示EGFR敏感或T790M突变水平会随着AZD9291的治疗而下降，但会随着治疗进程而增加，且出现了3种耐药突变类型。其中6个患者，检测到T790M伴随C797S突变，其中对2个患者的活检组织进行二代测序也证实C797S的出现。在T790M突变患者中，其中5名并未出现C797S。有趣的是，尽管在进展过程中EGFR突变呈现高表达，但有4名患者的T790M突变基本检测不到，这表明可能存在非T790M的耐药机制。

运用二代测序分析发现AZD9291的3种不同类型突变，包括之前未出现过的C797S突变。研究结果通过AZD9291的获得性耐药显示出肿瘤耐药机制的多样性，也强调需要寻找克服C797S介导耐药的治疗方案。

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