为了验证劳拉替尼在ALK阳性NSCLC细胞中的抑制能力，我们首先观察到劳拉替尼治疗下H3122和H2228细胞的增殖。劳拉替尼的结构如图所示。接下来，用不同浓度的劳拉替尼处理H3122和H2228细胞48小时。通过CCK-8测定评估细胞活力。两种NSCLC细胞系的生长明显被劳拉替尼抑制。通过集落形成测定法评价H1和H3122细胞的长期增殖能力。在劳拉替尼的压力下2228天，菌落数量以浓度依赖性方式减少。AKT/mTOR通路是ALK下游的重要信号通路之一，它在癌症的细胞增殖和存活中起着重要作用。

因此，我们通过蛋白质印迹分析了AKT/mTOR途径中的关键蛋白活性。结果表明，劳拉替尼诱导总ALK和AKT和mTOR磷酸化的快速，剂量依赖性降低。形态学检查清楚地表明这些细胞的形态变化，活细胞的数量也以浓度依赖性方式减少。这些结果表明，劳拉替尼有效抑制了ALK阳性NSCLC细胞的增殖。

为了进一步区分这些细胞的形态变化与凋亡或坏死变化，进行了其他几种测定。根据CCK-8测定的结果，劳拉替尼的工作浓度设定为10nM，因为该浓度不会导致显着的细胞死亡。流式细胞术用于分析膜联蛋白V-FITC和PI染色后的凋亡细胞数量。与对照组相比，劳拉替尼治疗显著诱导H3122和H2228细胞凋亡。染色也用于进一步验证劳拉替尼诱导的细胞凋亡的效果。早期凋亡细胞被黄点染成绿色，细胞质中存在气泡，而晚期凋亡细胞被染色为橙红色，细胞核破碎。非凋亡细胞染成绿色。

在用劳拉替尼治疗的组中观察到更多的EB穿过受损的细胞膜，嵌入细胞核DNA中，并在细胞核中积累更亮的橙红色荧光的现象。目前老挝第二药厂的劳拉替尼，规格100mg30s，价格3600元左右。一致的免疫印迹结果显示，劳拉替尼显着增加了细胞凋亡相关蛋白Bim的表达，并降低了H1和H1细胞中的MCL-1，p-MCL-2，BCL-2228和BCL-XL。综上所述，我们的结果表明，劳拉替尼在ALK阳性NSCLC细胞中以剂量依赖性方式显着诱导细胞凋亡。

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