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宫颈癌病人外周血PD-1检测的价值分析

时间:2019-08-09


宫颈癌在临床中比较常见,是一种妇科恶性肿瘤疾病,据世界范围内统计,每年大约有50万左右的宫颈癌新发病例,而且35岁以下女性宫颈癌发病率的上升趋势越来越明显。目前宫颈癌的治疗主要以手术治疗为主、放化疗为辅,但是手术的创伤和化疗的副作用在一定程度上影响着患者的生活质量。因此通过分子靶向治疗等生物基因手段治疗宫颈癌的可行性具有重要的现实意义。


程序性死亡受体-1(PD-1)是CD28/CTLA-4受体亚家族的一个成员,在活化T细胞、B细胞中均有表达,而且对于肿瘤细胞免疫逃逸具有明显介导作用,在肿瘤诊断、预后评估方面发挥了重要作用,是较为有效的一种生物学指标。PD-1可与配体PD-L1进行有效结合,对于CD4、CD8T细胞大量增殖、活化具有明显抑制作用,对于免疫应答具有负性调控作用,由此可对肿瘤免疫逃逸形成明显介导作用,使得肿瘤得到显著增长,因此通过检测PD-1可有效诊断宫颈癌。


本文在某医院妇产科选取74例宫颈癌患者,探讨通过抽取宫颈癌病人外周血,检测PD-1指标的价值,具体如下文所述。


方法:


采用流式细胞术对PD-1进行检测,首先对细胞样本予以制备,采集静脉血3ml,放置到抗凝管内,将其及时送到实验室,首先应制作CD3+PD-1+T细胞,将5μlCD3抗体、5μlPD-1抗体、50μl全血进行混合,将其缓慢混合均匀后,放置到室温下进行避光保存,在30min后置入250μl溶血剂,并缓慢混合均匀,在室温下避光放置12min,置入1ml流式细胞仪鞘液,按照1500r/min速度进行离心处理5min,然后洗涤2次,之后置入500μl鞘液重悬细胞,在3h时间内予以检测。在对样本检测时,需设定空白对照、同型对照。按照侧向散射光-前向散射光(SSC-FS)联合设门,统计1万淋巴细胞,分析CD3+PD-1+T细胞表达。统计CD3+PD-1+T细胞在淋巴细胞中的具体比例,采用阳性率(%)进行表示。


研究结果表明:


出生体重位于一斤到三斤间及胎龄小于26w的早产儿最为容易患上BPD。26w时,患儿肺发育尚处于小管期因而发育并不成熟。本次研究的结果表明早产儿出生体重越轻,胎龄越低,就越容易患上BPD。另外,以往的研究表明,BPD的形成原因与PDA有很大关系,其发病的主要原因是机械通气以及感染。针对机械通气,可以使用INSURE技术减少其使用从而减低肺损伤的发生概率。本次研究的结果显示,BPD患儿组中机械通气、宫内感染性肺炎以及PDA的比例显著高于非BPD患儿组,与以上研究相符。


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发布时间:2019-08-09




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方法:


采用流式细胞术对PD-1进行检测,首先对细胞样本予以制备,采集静脉血3ml,放置到抗凝管内,将其及时送到实验室,首先应制作CD3+PD-1+T细胞,将5μlCD3抗体、5μlPD-1抗体、50μl全血进行混合,将其缓慢混合均匀后,放置到室温下进行避光保存,在30min后置入250μl溶血剂,并缓慢混合均匀,在室温下避光放置12min,置入1ml流式细胞仪鞘液,按照1500r/min速度进行离心处理5min,然后洗涤2次,之后置入500μl鞘液重悬细胞,在3h时间内予以检测。在对样本检测时,需设定空白对照、同型对照。按照侧向散射光-前向散射光(SSC-FS)联合设门,统计1万淋巴细胞,分析CD3+PD-1+T细胞表达。统计CD3+PD-1+T细胞在淋巴细胞中的具体比例,采用阳性率(%)进行表示。


研究结果表明:


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